Waarom bacteriostatisch water 28 dagen krijgt — en waarom het meten van het conserveermiddel dat niet toetst.

Om de zoveel tijd circuleert er een zelf uitgevoerde stabiliteitstest die laat zien dat de benzylalcohol in een flacon bacteriostatisch water er na drie of vier maanden nog steeds in zit, met de suggestie dat de 28-dagenregel overdreven voorzichtig is. Die meting kan best kloppen. Ze meet alleen niet datgene waar de regel op rust.

Kernpunten

USP <797> stelt 28 dagen vanaf de eerste aanprik voor een conventioneel geproduceerde multidose-container, tenzij de fabrikant iets anders vermeldt.
Dat venster is gekoppeld aan de test op antimicrobiële effectiviteit volgens USP <51> — een biologische challengetest, geen chemische bepaling van de concentratie conserveermiddel.
<51> ent het product met vijf voorgeschreven organismen en telt overlevers op dag 7, 14 en 28 tegen log-reductiecriteria. Chromatografie beantwoordt een andere vraag.
De geldende datum is de kortste van alle componenten. Bij een gereconstitueerd peptide is dat doorgaans het peptide, niet het water.
Eén flacon per conditie, met een meetvariatie in dezelfde orde van grootte als de waargenomen verandering, kan geen enkele trend vaststellen — in geen van beide richtingen.

Wat de regel werkelijk zegt

USP-hoofdstuk <797> regelt steriele bereiding, en over multidose-containers is het kort: zodra een conventioneel geproduceerde multidose-container is aangeprikt, wordt hij niet langer dan 28 dagen gebruikt, tenzij de etikettering van de fabrikant anders bepaalt. Bacteriostatisch water voor injectie is precies zo’n container — een flacon die bedoeld is om herhaaldelijk te worden aangeprikt.

De reden dat multidose-flacons überhaupt herhaald aanprikken toestaan, is dat ze een antimicrobieel conserveermiddel bevatten. In bacteriostatisch water is dat doorgaans benzylalcohol. Elke naaldingang is een kans om organismen te introduceren; het conserveermiddel is wat voorkomt dat een binnengekomen organisme tussen twee ingangen door een populatie opbouwt.

De 28 dagen is een microbiologiegetal

Dit is het stuk dat verloren gaat. De beyond-use-richtlijn behandelt 28 dagen niet als een vaste eigenschap van de vloeistof. De geldende datum is de toegekende beyond-use-datum, of 28 dagen waar dat door <51>-testen wordt ondersteund, wat van beide het kortst is — en er moet een kortere datum worden toegekend wanneer de stabiliteit van welk bestanddeel dan ook korter is.

USP <51> is Antimicrobial Effectiveness Testing. Het is een challengetest: het product wordt bewust geënt met vijf voorgeschreven organismen — Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Candida albicans en Aspergillus brasiliensis — in een hoge begintelling, geïncubeerd bij 20–25 °C en bemonsterd tot en met dag 28. Overlevers worden geteld en uitgedrukt als log-reducties tegen categoriespecifieke acceptatiecriteria. Voor injecteerbare producten omvat de lat een vereiste reductie op dag 14 en geen hergroei op dag 28.

Let op wat die test vraagt. Niet hoeveel conserveermiddel is aanwezig, maar kan deze formulering een bewuste microbiële uitdaging 28 dagen lang onderdrukken. Dat zijn verschillende vragen, en alleen de tweede is waar het 28-dagenvenster op rust.

Waarom een chromatografiegetal dit niet beslecht

Daarom doet het terugkerende format — neem een of drie flacons, meet de benzylalcoholconcentratie met tussenpozen over enkele maanden, stel vast dat die nog binnen bereik ligt, concludeer dat de 28-dagenregel conservatief is — niet wat het lijkt te doen. De concentratie conserveermiddel is een surrogaat. De effectiviteit ervan is een biologisch eindpunt, en die twee kunnen uiteenlopen: werkzaamheid hangt af van de formulering als geheel, van wat er in de flacon is gebracht, en van hoelang organismen de tijd hebben gehad zich aan te passen.

Er is een tweede, elementairder probleem met zulke tests, en het staat meestal eerlijk in hun eigen beperkingenparagraaf: één flacon per opslagconditie, met een analytische variatie van vergelijkbare grootte als de gerapporteerde veranderingen. Als de meetruis ongeveer zo groot is als het effect, is een daling tussen twee tijdpunten niet te onderscheiden van de methode. Dat kun je niet als trend presenteren — en het uitblijven ervan evenmin als bewijs van stabiliteit.

Dat betekent niet dat zulke metingen waardeloos zijn. Ze zijn een redelijke haalbaarheidscheck op de vraag of het conserveermiddel regelrecht verdwijnt, en dat lijkt niet zo te zijn. Dat is een smallere claim dan er meestal uit wordt getrokken.

De klok die meestal als eerste afloopt

Voor wie een research-peptide reconstitueert, is het conserveermiddel sowieso zelden de beperkende factor. De bepalende datum is de kortste van alle componenten, en zodra een gelyofiliseerd peptide in oplossing is, is dat doorgaans het minst stabiele in de flacon. Peptiden in waterige oplossing zijn onderhevig aan hydrolyse, oxidatie, deamidering en aggregatie, op tijdschalen die per sequentie verschillen en vaak veel korter zijn dan het conserveringssysteem van het water.

Dit is hetzelfde principe als achter de opslagregels voor gelyofiliseerd poeder versus gereconstitueerde oplossing: op het moment dat er water bij komt, start een andere en meestal snellere afbraakklok. De vraag of de benzylalcohol er na vier maanden nog is, beantwoordt iets over het oplosmiddel, terwijl de opgeloste stof degene is die veranderd is.

Wat je hier overhoudt

Het getal 28 is geen slag om de arm en geen folklore. Het is het venster waarvoor van een geconserveerde multidose-container wordt verwacht dat hij onder een gedefinieerde test antimicrobiële effectiviteit heeft aangetoond, bovenop het besmettingsrisico dat herhaald aanprikken met zich meebrengt. Het mag langer zijn waar de etikettering van een fabrikant dat ondersteunt, en het moet korter zijn waar een component minder stabiel is.

Wat dit gesprek werkelijk verder zou helpen, is geen extra chromatografie. Het is challengetesten op flacons in gebruik — het <51>-eindpunt toegepast op flacons die onder realistische omstandigheden herhaaldelijk zijn aangeprikt, met genoeg herhalingen om variatie tussen flacons van een echt effect te scheiden. Voor zover wij kunnen nagaan is die studie voor dit gebruik niet gepubliceerd. Tot die er is, luidt de eerlijke positie dat de chemische metingen de regel niet weerleggen, omdat ze die nooit hebben getoetst.

WAAROM WIJ DE CIJFERS NIET GEWOON OVERNEMEN

Ons werd gevraagd te kijken naar een circulerende 120-daagse conserveermiddeltest. Wij nemen de dataset niet over, omdat de opzet naar onze lezing — één flacon per conditie, met een methodevariatie vergelijkbaar met de gerapporteerde verandering — de eruit getrokken conclusie niet kan dragen. Het onderliggende onderwerp is wel degelijk goed onderbouwd in de farmacopee, en daar is dit artikel op gebouwd.

Bronnen

USP General Chapter <797> Pharmaceutical Compounding — Sterile Preparations, Section 15.2: a conventionally manufactured multidose container is not used for more than 28 days after initial entry unless the manufacturer’s labeling specifies otherwise. www.usp.org
USP <797> beyond-use dating summary: after a container is entered, the BUD is the assigned BUD or 28 days if supported by <51> testing, whichever is shorter; a shorter BUD applies when component stability is shorter. www.arlok.com
Antimicrobial preservative effectiveness testing — method description (inoculation, incubation at 20–25 °C, plate counts at 7, 14 and 28 days, log-reduction criteria). Nelson Labs. www.nelsonlabs.com
USP <51> Antimicrobial Effectiveness Testing: the five challenge organisms and the category-based acceptance criteria. Consumer Product Testing Company. cptclabs.com
Multiple-dose vials may be punctured repeatedly because of the antimicrobial preservatives included in the container. Journal of Hematology Oncology Pharmacy, 2018. www.jhoponline.com